Wie war das nochmal mit der PCR?
1. Denaturierung
Erst wird auf 95 °C erhitzt, um die DNA in ihre Einzelstränge aufzutrennen. (Denaturierung). Weil Coronaviren RNA-Viren sind, muss die RNA vorher noch mithilfe des Enzyms Reverse-Transkriptase in komplementäre DNA umgeschrieben werden.
2. Annealing
Dann wird auf 50 bis 60 °C abgekühlt. Die Temperatur muss geringfügig unter der Schmelztemperatur der verwendeten Primer liegen. Nun können sich die komplementären Primer an die Einzelstränge der Ziel-Sequenz anlagern.
3. Elongation
Später wird die Temperatur wieder angehoben, in der Regel auf 72 °C. Da ist die Polymerase besonders aktiv. Sie baut eine Kopie der durch die Primer markierten charakteristischen DNA-Sequenz auf.
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Probenmaterial
von Monika Schmid am 31.01.2022 um 8:51 Uhr
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